U prethodnom projektu testiranja lokalnih postrojenja za preradu hrane za komarce na Tajlandu, utvrđeno je da eterična ulja (EO) Cyperus rotundus, galangal i cimet imaju dobru aktivnost protiv komaraca protiv Aedes aegypti.U pokušaju da se smanji upotreba tradicionalnihinsekticidii poboljšati kontrolu rezistentnih populacija komaraca, ova studija je imala za cilj identificirati potencijalni sinergizam između adulticidnih učinaka etilen oksida i toksičnosti permetrina za Aedes komarce.aegypti, uključujući sojeve otporne na piretroide i osjetljive.
Za procjenu hemijskog sastava i aktivnosti ubijanja EO ekstrahiranog iz rizoma C. rotundus i A. galanga i kore C. verum protiv osjetljivog soja Muang Chiang Mai (MCM-S) i rezistentnog soja Pang Mai Dang (PMD-R ).) Odrasli aktivni Ae.Aedes aegypti.Biološki test za odrasle EO-permetrin mješavine je također obavljen na ovim Aedes komarcima kako bi se razumjela njihova sinergijska aktivnost.aegypti sojevi.
Hemijska karakterizacija pomoću GC-MS analitičke metode pokazala je da je 48 jedinjenja identifikovano iz EO C. rotundus, A. galanga i C. verum, što čini 80,22%, 86,75% i 97,24% ukupnih komponenti, respektivno.Ciperen (14,04%), β-bisabolen (18,27%) i cinamaldehid (64,66%) su glavne komponente ulja ciperusa, galangalovog ulja i balzamičnog ulja.U biološkim testovima ubijanja odraslih, C. rotundus, A. galanga i C. verum EV su bili efikasni u ubijanju Ae.Vrijednosti LD50 aegypti, MCM-S i PMD-R bile su 10,05 i 9,57 μg/mg za ženke, 7,97 i 7,94 μg/mg za ženke, odnosno 3,30 i 3,22 μg/mg za žene.Efikasnost MCM-S i PMD-R Ae u ubijanju odraslih osoba.aegypti u ovim EO je bio blizu piperonil butoksida (PBO vrijednosti, LD50 = 6,30 i 4,79 μg/mg za žene, respektivno), ali ne tako izražen kao permetrin (vrijednosti LD50 = 0,44 i 3,70 ng/mg za žene).Međutim, kombinovani biološki testovi su otkrili sinergiju između EO i permetrina.Značajan sinergizam sa permetrinom protiv dva soja Aedes komaraca.Aedes aegypti je zabilježen u EM C. rotundus i A. galanga.Dodatak ulja C. rotundus i A. galanga značajno je smanjio LD50 vrijednosti permetrina na MCM-S sa 0,44 na 0,07 ng/mg i 0,11 ng/mg kod ženki, respektivno, uz vrijednosti omjera sinergije (SR) od 6,28 i 4,00 respektivno.Osim toga, C. rotundus i A. galanga EO su također značajno smanjili LD50 vrijednosti permetrina na PMD-R sa 3,70 na 0,42 ng/mg i 0,003 ng/mg kod ženki, respektivno, sa SR vrijednostima od 8,81 i 1233,33, respektivno..
Sinergistički učinak kombinacije EO-permetrina za povećanje toksičnosti za odrasle protiv dva soja komaraca Aedes.Aedes aegypti pokazuje obećavajuću ulogu etilen oksida kao sinergista u poboljšanju efikasnosti protiv komaraca, posebno tamo gdje su tradicionalni spojevi nedjelotvorni ili neprikladni.
Komarac Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) glavni je vektor denga groznice i drugih zaraznih virusnih bolesti kao što su žuta groznica, chikungunya i Zika virus, koji predstavljaju ogromnu i trajnu prijetnju za ljude[1, 2]..Virus denga je najteža patogena hemoragijska groznica koja pogađa ljude, s procjenom od 5 do 100 miliona slučajeva koji se javljaju godišnje i više od 2,5 milijardi ljudi širom svijeta u opasnosti [3].Epidemije ove zarazne bolesti predstavljaju ogroman teret za stanovništvo, zdravstvene sisteme i ekonomije većine tropskih zemalja [1].Prema tajlandskom ministarstvu zdravlja, bilo je 142.925 slučajeva denga groznice i 141 smrtni slučaj u cijeloj zemlji u 2015., što je više od tri puta više od broja slučajeva i smrti u 2014. [4].Uprkos istorijskim dokazima, denga groznica je iskorijenjena ili uvelike smanjena komarcem Aedes.Nakon kontrole Aedes aegypti [5], stopa infekcije je dramatično porasla i bolest se proširila po cijelom svijetu, dijelom zbog decenija globalnog zagrijavanja.Eliminacija i kontrola Ae.Aedes aegypti je relativno težak jer je domaći komarac vektor koji se pari, hrani, odmara i polaže jaja u i oko ljudskog prebivališta tokom dana.Osim toga, ovaj komarac ima sposobnost prilagođavanja promjenama okoliša ili poremećajima uzrokovanim prirodnim događajima (kao što je suša) ili mjerama ljudske kontrole, te se može vratiti na svoju prvobitnu brojnost [6, 7].Budući da su vakcine protiv denga groznice tek nedavno odobrene i ne postoji poseban tretman za denga groznicu, sprečavanje i smanjenje rizika od prenošenja denga groznice u potpunosti ovisi o kontroli vektora komaraca i eliminaciji ljudskog kontakta s vektorima.
Konkretno, upotreba hemikalija za kontrolu komaraca sada igra važnu ulogu u javnom zdravlju kao važna komponenta sveobuhvatnog integrisanog upravljanja vektorima.Najpopularnije hemijske metode uključuju upotrebu nisko toksičnih insekticida koji djeluju protiv larvi komaraca (larvicidi) i odraslih komaraca (adidocidi).Kontrola larvi kroz smanjenje izvora i redovnu upotrebu hemijskih larvicida kao što su organofosfati i regulatori rasta insekata smatra se važnom.Međutim, štetni utjecaji na okoliš povezani sa sintetičkim pesticidima i njihovo radno intenzivno i složeno održavanje ostaju glavna briga [8, 9].Tradicionalna aktivna kontrola vektora, kao što je kontrola odraslih, ostaje najefikasnije sredstvo kontrole tokom izbijanja virusa jer može brzo i u velikim razmjerima iskorijeniti vektore zaraznih bolesti, kao i smanjiti životni vijek i dugovječnost lokalnih vektorskih populacija [3]., 10].Četiri klase hemijskih insekticida: organoklorni (koji se nazivaju samo DDT), organofosfati, karbamati i piretroidi čine osnovu programa kontrole vektora, pri čemu se piretroidi smatraju najuspešnijom klasom.Visoko su efikasni protiv raznih artropoda i imaju nisku efikasnost.toksičnost za sisare.Trenutno, sintetički piretroidi čine većinu komercijalnih pesticida, čineći oko 25% globalnog tržišta pesticida [11, 12].Permetrin i deltametrin su piretroidni insekticidi širokog spektra koji se decenijama koriste širom svijeta za suzbijanje raznih štetočina od poljoprivredne i medicinske važnosti [13, 14].1950-ih, DDT je odabran kao hemikalija izbora za tajlandski nacionalni program kontrole komaraca u javnom zdravlju.Nakon široke upotrebe DDT-a u endemskim područjima malarije, Tajland je postepeno ukinuo upotrebu DDT-a između 1995. i 2000. godine i zamijenio ga s dva piretroida: permetrinom i deltametrinom [15, 16].Ovi piretroidni insekticidi uvedeni su ranih 1990-ih za suzbijanje malarije i denga groznice, prvenstveno kroz tretmane mrežama za krevet i korištenjem termalne magle i sprejeva ultra niske toksičnosti [14, 17].Međutim, oni su izgubili efikasnost zbog jake otpornosti komaraca i nepoštivanja javnosti zbog zabrinutosti za javno zdravlje i uticaj sintetičkih hemikalija na životnu sredinu.Ovo predstavlja značajne izazove za uspjeh programa kontrole vektora prijetnji [14, 18, 19].Da bi strategija bila djelotvornija, neophodne su pravovremene i odgovarajuće protumjere.Preporučeni postupci upravljanja uključuju zamjenu prirodnih supstanci, rotaciju hemikalija različitih klasa, dodavanje sinergista i miješanje hemikalija ili istovremenu primjenu hemikalija različitih klasa [14, 20, 21].Stoga, postoji hitna potreba da se pronađe i razvije ekološki prihvatljiva, zgodna i efikasna alternativa i sinergista i ova studija ima za cilj da odgovori na ovu potrebu.
Insekticidi prirodnog porijekla, posebno oni na bazi biljnih komponenti, pokazali su potencijal u evaluaciji sadašnjih i budućih alternativa suzbijanja komaraca [22, 23, 24].Nekoliko studija je pokazalo da je moguće kontrolisati važne vektore komaraca upotrebom biljnih proizvoda, posebno eteričnih ulja (EO), kao ubojica odraslih.Adulacidna svojstva protiv nekih važnih vrsta komaraca pronađena su u mnogim biljnim uljima kao što su celer, kumin, zedoaria, anis, cijev, timijan, schinus terebinolia, cymbopogon giganteus, chenopodium ambrosioides, chenopodium ambrosioides, chenopodium ambrosioides, chenopodium ambrosioides, chenopodium ambrosioides, chenopodium ambrosioides, chenopodospermum planchoniii, eukaliptus ter eeticrnis ., Eucalyptus citriodora, Cananga odorata i Petroselinum Criscum [25,26,27,28,29,30].Etilen oksid se sada koristi ne samo sam, već i u kombinaciji sa ekstrahovanim biljnim supstancama ili postojećim sintetičkim pesticidima, proizvodeći različite stepene toksičnosti.Kombinacije tradicionalnih insekticida kao što su organofosfati, karbamati i piretroidi sa etilen oksidom/biljnim ekstraktima djeluju sinergistički ili antagonistički u svojim toksičnim efektima i pokazali su se efikasnim protiv vektora bolesti i štetočina [31,32,33,34,35].Međutim, većina studija o sinergističkim toksičnim efektima kombinacija fitokemikalija sa ili bez sintetičkih hemikalija provedena je na vektorima poljoprivrednih insekata i štetočinama, a ne na medicinski važnim komarcima.Štoviše, većina rada na sinergističkim efektima kombinacija biljnih i sintetičkih insekticida protiv vektora komaraca fokusirana je na larvicidni učinak.
U prethodnoj studiji koju su proveli autori kao dio tekućeg istraživačkog projekta skrininga intimicida iz autohtonih prehrambenih biljaka na Tajlandu, otkriveno je da etilen oksidi iz Cyperus rotundus, galangala i cimeta imaju potencijalnu aktivnost protiv odraslih Aedes.Egipat [36].Stoga je ova studija imala za cilj da proceni efikasnost EO izolovanih iz ovih lekovitih biljaka protiv komaraca Aedes.aegypti, uključujući sojeve otporne na piretroide i osjetljive.Sinergistički učinak binarnih mješavina etilen oksida i sintetičkih piretroida s dobrom djelotvornošću kod odraslih je također analiziran kako bi se smanjila upotreba tradicionalnih insekticida i povećala otpornost na vektore komaraca, posebno protiv Aedes.Aedes aegypti.Ovaj članak izvještava o kemijskoj karakterizaciji djelotvornih eteričnih ulja i njihovom potencijalu da pojačaju toksičnost sintetičkog permetrina protiv Aedes komaraca.aegypti kod sojeva osjetljivih na piretroide (MCM-S) i rezistentnih sojeva (PMD-R).
Rizomi C. rotundus i A. galanga i kora C. verum (slika 1) koji se koriste za ekstrakciju eteričnog ulja kupljeni su od dobavljača biljnih lijekova u provinciji Chiang Mai, Tajland.Naučna identifikacija ovih biljaka postignuta je kroz konsultacije sa gospodinom Jamesom Franklinom Maxwellom, botaničarom herbarijuma, Odsjek za biologiju, Fakultet nauka, Univerzitet Chiang Mai (CMU), provincija Chiang Mai, Tajland, i naučnikom Wannari Charoensap;na Odsjeku za farmaciju, Farmaceutskom fakultetu Univerziteta Carnegie Mellon, uzorci gospođe vaučera svake biljke čuvaju se u Odsjeku za parazitologiju Medicinskog fakulteta Univerziteta Carnegie Mellon za buduću upotrebu.
Uzorci biljaka su pojedinačno sušeni u hladu 3-5 dana na otvorenom prostoru sa aktivnom ventilacijom i temperaturom okoline od približno 30 ± 5 °C kako bi se uklonio sadržaj vlage prije ekstrakcije prirodnih eteričnih ulja (EO).Ukupno 250 g svakog suvog biljnog materijala mehanički je mljeveno u grubi prah i korišteno za izolaciju eteričnih ulja (EO) destilacijom vodenom parom.Aparat za destilaciju sastojao se od električnog grijača, tikvice s okruglim dnom od 3000 mL, kolone za ekstrakciju, kondenzatora i uređaja Cool ace (Eyela Cool Ace CA-1112 CE, Tokyo Rikakikai Co. Ltd., Tokio, Japan) .Dodajte 1600 ml destilovane vode i 10-15 staklenih kuglica u tikvicu, a zatim je zagrijte na približno 100°C pomoću električnog grijača najmanje 3 sata dok se destilacija ne završi i više se ne proizvodi EO.EO sloj je odvojen od vodene faze pomoću levka za odvajanje, osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata (Na2SO4) i pohranjen u zatvorenoj smeđoj boci na 4°C dok se ne ispita hemijski sastav i aktivnost odraslih.
Hemijski sastav eteričnih ulja rađen je istovremeno sa biotestom za odraslu supstancu.Kvalitativna analiza je izvršena korištenjem GC-MS sistema koji se sastoji od plinskog hromatografa Hewlett-Packard (Wilmington, Kalifornija, SAD) 7890A opremljenog jednim kvadrupolnim masovno selektivnim detektorom (Agilent Technologies, Wilmington, Kalifornija, SAD) i MSD 5975C (EI ).(Agilent Technologies).
Kromatografska kolona – DB-5MS (30 m × ID 0,25 mm × debljina filma 0,25 µm).Ukupno vreme rada GC-MS je 20 minuta.Uslovi analize su da temperature injektora i prenosnog voda budu 250, odnosno 280 °C;temperatura peći je podešena da se povećava sa 50°C na 250°C brzinom od 10°C/min, gas nosač je helijum;brzina protoka 1,0 ml/min;zapremina injekcije je 0,2 µL (1/10% zapremine u CH2Cl2, omjer podjele 100:1);Za GC-MS detekciju se koristi sistem elektronske jonizacije sa energijom jonizacije od 70 eV.Opseg akvizicije je 50–550 jedinica atomske mase (amu), a brzina skeniranja je 2,91 skeniranja u sekundi.Relativni procenti komponenti izraženi su kao procenti normalizovani po površini vrha.Identifikacija sastojaka EO zasniva se na njihovom indeksu zadržavanja (RI).RI je izračunat korištenjem jednadžbe Van den Doola i Kratz-a [37] za seriju n-alkana (C8-C40) i upoređen s indeksima zadržavanja iz literature [38] i bibliotečkih baza podataka (NIST 2008 i Wiley 8NO8).Identitet prikazanih spojeva, kao što su struktura i molekularna formula, potvrđen je poređenjem s dostupnim autentičnim uzorcima.
Analitički standardi za sintetički permetrin i piperonil butoksid (PBO, pozitivna kontrola u sinergijskim studijama) nabavljeni su od Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, SAD).Kompleti za testiranje odraslih Svjetske zdravstvene organizacije (WHO) i dijagnostičke doze papira impregniranog permetrinom (0,75%) komercijalno su kupljeni od Centra za kontrolu vektora Svjetske zdravstvene organizacije u Penangu, Malezija.Sve ostale korišćene hemikalije i reagensi bili su analitičkog kvaliteta i kupljeni su od lokalnih institucija u provinciji Čijang Maj, Tajland.
Komarci koji su korišteni kao test organizmi u biološkom testu odraslih bili su laboratorijski komarci Aedes koji se slobodno pare.aegypti, uključujući osjetljivi soj Muang Chiang Mai (MCM-S) i rezistentni soj Pang Mai Dang (PMD-R).Soj MCM-S je dobijen iz lokalnih uzoraka prikupljenih u oblasti Muang Chiang Mai, provincija Chiang Mai, Tajland, i održava se u entomološkoj sobi Odsjeka za parazitologiju, CMU School of Medicine, od 1995. godine [39].PMD-R soj, za koji je utvrđeno da je otporan na permetrin, izolovan je iz poljskih komaraca koji su prvobitno sakupljeni iz Ban Pang Mai Danga, okrug Mae Tang, provincija Chiang Mai, Tajland, i održava se u istom institutu od 1997. [40 ].PMD-R sojevi su uzgajani pod selektivnim pritiskom kako bi se održali nivoi rezistencije povremenim izlaganjem 0,75% permetrina koristeći WHO komplet za detekciju uz neke modifikacije [41].Svaki soj Ae.Aedes aegypti je koloniziran pojedinačno u laboratoriji bez patogena na 25 ± 2 °C i 80 ± 10% relativnoj vlažnosti i fotoperiodu svjetlosti/tame od 14:10 sati.Otprilike 200 larvi držano je u plastičnim posudama (33 cm duge, 28 cm široke i 9 cm) napunjene vodom iz slavine gustine 150-200 larvi po poslužavniku i hranjene dva puta dnevno steriliziranim psećim keksima.Odrasli crvi su držani u vlažnim kavezima i kontinuirano hranjeni 10% vodenim rastvorom saharoze i 10% rastvorom multivitaminskog sirupa.Ženke komaraca redovno sišu krv kako bi položile jaja.Ženke stare dva do pet dana koje nisu hranjene krvlju mogu se kontinuirano koristiti u eksperimentalnim biološkim testovima odraslih.
Biološki test odgovora na dozu i mortalitet EO izveden je na odraslim ženkama Aedes komaraca.aegypti, MCM-S i PMD-R koristeći topikalnu metodu modificiranu u skladu sa standardnim protokolom SZO za testiranje osjetljivosti [42].EO iz svake biljke je serijski razrijeđen odgovarajućim rastvaračem (npr. etanolom ili acetonom) da bi se dobio stepenovani niz od 4-6 koncentracija.Nakon anestezije ugljičnim dioksidom (CO2), komarci su pojedinačno izmjereni.Anestezirani komarci su zatim držani nepomični na suhom filter papiru na prilagođenoj hladnoj ploči pod stereomikroskopom kako bi se spriječila reaktivacija tokom postupka.Za svaki tretman, 0,1 μl EO rastvora je naneseno na gornji pronotum ženke pomoću Hamilton ručnog mikrodozatora (700 Series Microliter™, Hamilton Company, Reno, NV, SAD).Dvadeset i pet žena je tretirano sa svakom koncentracijom, sa mortalitetom u rasponu od 10% do 95% za najmanje 4 različite koncentracije.Kao kontrola služili su komarci tretirani rastvaračem.Da biste spriječili kontaminaciju testnih uzoraka, zamijenite filter papir novim filter papirom za svaki testirani EO.Doze korištene u ovim biološkim testovima izražene su u mikrogramima EO po miligramu tjelesne težine žive ženke.Aktivnost PBO odraslih je također procijenjena na sličan način kao EO, pri čemu je PBO korišten kao pozitivna kontrola u sinergističkim eksperimentima.Tretirani komarci u svim grupama stavljeni su u plastične čaše i davani su 10% saharoze plus 10% multivitaminskog sirupa.Svi biološki testovi su izvedeni na 25 ± 2 °C i 80 ± 10% relativne vlažnosti i ponovljeni četiri puta sa kontrolama.Smrtnost tokom 24-satnog perioda uzgoja je provjerena i potvrđena nedostatkom odgovora komarca na mehaničku stimulaciju, a zatim zabilježena na osnovu prosjeka od četiri ponavljanja.Eksperimentalni tretmani su ponovljeni četiri puta za svaki test uzorak koristeći različite serije komaraca.Rezultati su sumirani i korišteni za izračunavanje procentualne stope mortaliteta, koja je korištena za određivanje 24-časovne smrtonosne doze probit analizom.
Sinergistički anticidni učinak EO i permetrina procijenjen je primjenom postupka ispitivanja lokalne toksičnosti [42] kao što je prethodno opisano.Koristite aceton ili etanol kao otapalo za pripremu permetrina u željenoj koncentraciji, kao i binarnu mješavinu EO i permetrina (EO-permetrin: permetrin pomiješan sa EO u koncentraciji LD25).Kompleti za testiranje (permetrin i EO-permetrin) su ocjenjivani u odnosu na MCM-S i PMD-R sojeve Ae.Aedes aegypti.Svakoj od 25 ženki komaraca date su četiri doze permetrina kako bi se testirala njegova efikasnost u ubijanju odraslih osoba, pri čemu je svaki tretman ponovljen četiri puta.Da bi se identifikovali kandidati za EO sinergiste, 4 do 6 doza EO-permetrina dato je svakoj od 25 ženki komaraca, pri čemu je svaka aplikacija ponovljena četiri puta.Tretman PBO-permetrinom (permetrin pomiješan sa LD25 koncentracijom PBO) je također poslužio kao pozitivna kontrola.Doze korištene u ovim biološkim testovima izražene su u nanogramima testnog uzorka po miligramu žive tjelesne težine ženke.Četiri eksperimentalne procjene za svaki soj komaraca provedene su na pojedinačno uzgojenim serijama, a podaci o smrtnosti su objedinjeni i analizirani korištenjem Probita za određivanje 24-satne smrtonosne doze.
Stopa mortaliteta je prilagođena pomoću Abbott formule [43].Prilagođeni podaci analizirani su Probit regresionom analizom pomoću programa za kompjutersku statistiku SPSS (verzija 19.0).Smrtonosne vrijednosti od 25%, 50%, 90%, 95% i 99% (LD25, LD50, LD90, LD95 i LD99, respektivno) izračunate su korištenjem odgovarajućih intervala povjerenja od 95% (95% CI).Mjerenja značajnosti i razlika između testnih uzoraka procijenjena su pomoću hi-kvadrat testa ili Mann-Whitney U testa unutar svakog biološkog testa.Rezultati su smatrani statistički značajnim kod P< 0,05.Koeficijent otpora (RR) se procjenjuje na nivou LD50 koristeći sljedeću formulu [12]:
RR > 1 označava otpor, a RR ≤ 1 označava osjetljivost.Vrijednost omjera sinergije (SR) svakog kandidata za sinergistu izračunava se na sljedeći način [34, 35, 44]:
Ovaj faktor dijeli rezultate u tri kategorije: smatra se da vrijednost SR od 1±0,05 nema vidljiv učinak, vrijednost SR od >1,05 ima sinergistički učinak, a vrijednost SR od svijetložutog tekućeg ulja može biti dobijeno parnom destilacijom rizoma C. rotundus i A. galanga i kore C. verum.Prinosi izračunati na suvu težinu su 0,15%, 0,27% (mas./tež.) i 0.54% (v/v).w) odnosno (Tabela 1).GC-MS ispitivanje hemijskog sastava ulja C. rotundus, A. galanga i C. verum pokazalo je prisustvo 19, 17 i 21 jedinjenja, koji su činili 80,22, 86,75 i 97,24% svih komponenti, respektivno (tabela 2 ).Jedinjenja ulja rizoma C. lucidum uglavnom se sastoje od ciperonena (14,04%), zatim karalena (9,57%), α-kapselana (7,97%) i α-kapselana (7,53%).Glavna hemijska komponenta ulja rizoma galangala je β-bisabolen (18,27%), zatim α-bergamoten (16,28%), 1,8-cineol (10,17%) i piperonol (10,09%).Dok je cinamaldehid (64,66%) identificiran kao glavna komponenta ulja kore C. verum, cimet acetat (6,61%), α-copaen (5,83%) i 3-fenilpropionaldehid (4,09%) su smatrani sporednim sastojcima.Hemijske strukture ciperna, β-bisabolena i cinamaldehida su glavna jedinjenja C. rotundus, A. galanga i C. verum, kao što je prikazano na slici 2.
Rezultati tri OO-a su procijenili aktivnost odraslih protiv Aedes komaraca.aegypti komarci su prikazani u tabeli 3. Utvrđeno je da svi EO imaju smrtonosne efekte na komarce MCM-S Aedes u različitim tipovima i dozama.Aedes aegypti.Najefikasniji EO je C. verum, zatim A. galanga i C. rotundus sa vrijednostima LD50 od 3,30, 7,97 i 10,05 μg/mg MCM-S ženke respektivno, nešto više od 3,22 (U = 1), Z = -0,775, P = 0,667), 7,94 (U = 2, Z = 0, P = 1) i 9,57 (U = 0, Z = -1,549, P = 0,333) μg/mg PMD -R kod žena.Ovo odgovara da PBO ima nešto veći učinak kod odraslih na PMD-R od soja MSM-S, sa vrijednostima LD50 od 4,79 i 6,30 μg/mg ženki, respektivno (U = 0, Z = -2,021, P = 0,057 ) .).Može se izračunati da su vrijednosti LD50 C. verum, A. galanga, C. rotundus i PBO u odnosu na PMD-R približno 0,98, 0,99, 0,95 i 0,76 puta niže od onih u odnosu na MCM-S.Dakle, ovo ukazuje da je osjetljivost na PBO i EO relativno slična između dva Aedes soja.Iako je PMD-R bio osjetljiviji od MCM-S, osjetljivost Aedes aegypti nije bila značajna.Nasuprot tome, dva Aedes soja su se uvelike razlikovala po svojoj osjetljivosti na permetrin.aegypti (Tabela 4).PMD-R je pokazao značajnu otpornost na permetrin (LD50 vrijednost = 0,44 ng/mg kod žena) sa višom vrijednošću LD50 od 3,70 u poređenju sa MCM-S (LD50 vrijednost = 0,44 ng/mg kod žena) ng/mg kod žena (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029).Iako je PMD-R mnogo manje osjetljiv na permetrin od MCM-S, njegova osjetljivost na ulja PBO i C. verum, A. galanga i C. rotundus je nešto veća od MCM-S.
Kao što je uočeno u biološkom testu odrasle populacije kombinacije EO-permetrin, binarne mješavine permetrina i EO (LD25) su pokazale ili sinergiju (SR vrijednost > 1,05) ili nikakav efekat (SR vrijednost = 1 ± 0,05).Složeni efekti mješavine EO-permetrina na odrasle osobe na eksperimentalne albino komarce.Aedes aegypti sojevi MCM-S i PMD-R prikazani su u tabeli 4 i slici 3. Utvrđeno je da dodavanje ulja C. verum blago smanjuje LD50 permetrina u odnosu na MCM-S i blago povećava LD50 prema PMD-R na 0,44– 0,42 ng/mg kod žena i od 3,70 do 3,85 ng/mg kod žena, respektivno.Nasuprot tome, dodavanje ulja C. rotundus i A. galanga značajno je smanjilo LD50 permetrina na MCM-S sa 0,44 na 0,07 (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029) i na 0,11 (U = 0)., Z) = -2,309, P = 0,029) ng/mg žene.Na osnovu LD50 vrijednosti MCM-S, SR vrijednosti mješavine EO-permetrina nakon dodavanja ulja C. rotundus i A. galanga bile su 6,28 i 4,00, respektivno.Shodno tome, LD50 permetrina u odnosu na PMD-R značajno se smanjio sa 3,70 na 0,42 (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029) i na 0,003 uz dodatak ulja C. rotundus i A. galanga (U = 0 ) ., Z = -2,337, P = 0,029) ng/mg ženke.SR vrijednost permetrina u kombinaciji sa C. rotundus prema PMD-R bila je 8,81, dok je SR vrijednost mješavine galangal-permetrina bila 1233,33.U odnosu na MCM-S, vrijednost LD50 pozitivne kontrole PBO smanjena je sa 0,44 na 0,26 ng/mg (ženke) i sa 3,70 ng/mg (ženke) na 0,65 ng/mg (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029) i PMD-R (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029).Vrijednosti SR mješavine PBO-permetrina za sojeve MCM-S i PMD-R bile su 1,69 i 5,69, respektivno.Ovi rezultati pokazuju da ulja C. rotundus i A. galanga i PBO povećavaju toksičnost permetrina u većoj mjeri nego ulje C. verum za sojeve MCM-S i PMD-R.
Aktivnost odraslih (LD50) EO, PBO, permetrina (PE) i njihovih kombinacija protiv sojeva Aedes komaraca osjetljivih na piretroid (MCM-S) i rezistentnih (PMD-R).Aedes aegypti
[45].Sintetički piretroidi se koriste širom svijeta za suzbijanje gotovo svih artropoda od poljoprivredne i medicinske važnosti.Međutim, zbog štetnih posljedica primjene sintetičkih insekticida, posebno u smislu razvoja i raširene otpornosti komaraca, kao i utjecaja na dugoročno zdravlje i okoliš, sada postoji hitna potreba za smanjenjem upotrebe tradicionalnih sintetičkih insekticida i razviti alternative [35, 46, 47].Pored zaštite životne sredine i zdravlja ljudi, prednosti botaničkih insekticida uključuju visoku selektivnost, globalnu dostupnost i lakoću proizvodnje i upotrebe, što ih čini privlačnijim za kontrolu komaraca [32,48,49].Ova studija, osim što je razjasnila hemijske karakteristike efikasnih eteričnih ulja putem GC-MS analize, takođe je procijenila moć eteričnih ulja odraslih i njihovu sposobnost da pojačaju toksičnost sintetičkog permetrina.aegypti kod sojeva osjetljivih na piretroide (MCM-S) i rezistentnih sojeva (PMD-R).
GC-MS karakterizacija je pokazala da su cipern (14,04%), β-bisabolen (18,27%) i cinamaldehid (64,66%) glavne komponente ulja C. rotundus, A. galanga i C. verum.Ove hemikalije su pokazale različite biološke aktivnosti.Ahn et al.[50] su objavili da 6-acetoksiciperen, izolovan iz rizoma C. rotundus, djeluje kao antitumorsko jedinjenje i može inducirati apoptozu zavisnu od kaspaze u stanicama raka jajnika.β-Bisabolen, ekstrahovan iz eteričnog ulja stabla smirne, pokazuje specifičnu citotoksičnost protiv ćelija tumora dojke kod ljudi i miša i in vitro i in vivo [51].Za cinamaldehid, dobijen iz prirodnih ekstrakata ili sintetiziran u laboratoriji, prijavljeno je da ima insekticidno, antibakterijsko, antifungalno, protuupalno, imunomodulatorno, antikancerogeno i antiangiogeno djelovanje [52].
Rezultati biološkog testa aktivnosti odraslih koji zavise od doze pokazali su dobar potencijal testiranih EO i pokazali su da sojevi komaraca Aedes MCM-S i PMD-R imaju sličnu osjetljivost na EO i PBO.Aedes aegypti.Poređenje efikasnosti EO i permetrina pokazalo je da potonji ima jači alercidni efekat: vrednosti LD50 su 0,44 i 3,70 ng/mg kod ženki za sojeve MCM-S i PMD-R, respektivno.Ovi nalazi su potkrijepljeni mnogim studijama koje pokazuju da su prirodni pesticidi, posebno proizvodi biljnog porijekla, općenito manje učinkoviti od sintetičkih supstanci [31, 34, 35, 53, 54].To može biti zato što je prvi složena kombinacija aktivnih ili neaktivnih sastojaka, dok je drugi pročišćeni pojedinačni aktivni spoj.Međutim, raznolikost i složenost prirodnih aktivnih sastojaka s različitim mehanizmima djelovanja mogu povećati biološku aktivnost ili spriječiti razvoj rezistencije u populacijama domaćina [55, 56, 57].Mnogi istraživači su prijavili potencijal protiv komaraca C. verum, A. galanga i C. rotundus i njihovih komponenti kao što su β-bisabolen, cinamaldehid i 1,8-cineol [22, 36, 58, 59, 60,61, 62,63 ,64].Međutim, pregled literature otkrio je da nije bilo prethodnih izvještaja o njegovom sinergističkom učinku s permetrinom ili drugim sintetičkim insekticidima protiv komaraca Aedes.Aedes aegypti.
U ovoj studiji uočene su značajne razlike u osjetljivosti na permetrin između dva Aedes soja.Aedes aegypti.MCM-S je osjetljiv na permetrin, dok je PMD-R mnogo manje osjetljiv na njega, sa stopom rezistencije od 8,41.U poređenju sa osetljivošću MCM-S, PMD-R je manje osetljiv na permetrin, ali je osetljiviji na EO, što predstavlja osnovu za dalje studije koje imaju za cilj povećanje efikasnosti permetrina kombinovanjem sa EO.Sinergistički kombinovani biotest za efekte odraslih pokazao je da binarne mješavine EO i permetrina smanjuju ili povećavaju smrtnost odraslih Aedes.Aedes aegypti.Dodavanje ulja C. verum blago je smanjilo LD50 permetrina u odnosu na MCM-S, ali je neznatno povećalo LD50 u odnosu na PMD-R sa vrijednostima SR od 1,05 odnosno 0,96.Ovo ukazuje da ulje C. verum nema sinergistički ili antagonistički efekat na permetrin kada se testira na MCM-S i PMD-R.Nasuprot tome, ulja C. rotundus i A. galanga pokazala su značajan sinergistički učinak značajno smanjenjem LD50 vrijednosti permetrina na MCM-S ili PMD-R.Kada je permetrin kombinovan sa EO C. rotundus i A. galanga, vrednosti SR mešavine EO-permetrina za MCM-S bile su 6,28 i 4,00, respektivno.Dodatno, kada je permetrin procijenjen u odnosu na PMD-R u kombinaciji sa C. rotundus (SR = 8,81) ili A. galanga (SR = 1233,33), SR vrijednosti su se značajno povećale.Vrijedi napomenuti da su i C. rotundus i A. galanga povećale toksičnost permetrina protiv PMD-R Ae.aegypti značajno.Slično je utvrđeno da PBO povećava toksičnost permetrina sa vrijednostima SR od 1,69 i 5,69 za sojeve MCM-S i PMD-R, respektivno.Budući da su C. rotundus i A. galanga imale najveće SR vrijednosti, smatralo se da su oni najbolji sinergisti u povećanju toksičnosti permetrina na MCM-S i PMD-R, respektivno.
Nekoliko prethodnih studija izvijestilo je o sinergijskom učinku kombinacija sintetičkih insekticida i biljnih ekstrakata protiv različitih vrsta komaraca.Larvicidni biološki test protiv Anopheles Stephensija koji su proučavali Kalayanasundaram i Das [65] pokazao je da je fention, organofosfat širokog spektra, povezan sa Cleodendron inerme, Pedalium murax i Parthenium hysterophorus.Uočena je značajna sinergija između ekstrakata sa sinergističkim učinkom (SF) od 1,31., 1.38, 1.40, 1.48, 1.61 i 2.23, respektivno.U larvicidnom skriningu 15 vrsta mangrova, otkriveno je da je ekstrakt petrolej etra korijena mangrova najefikasniji protiv Culex quinquefasciatus sa LC50 vrijednošću od 25,7 mg/L [66].Sinergistički učinak ovog ekstrakta i botaničkog insekticida piretruma također je zabilježen da smanjuje LC50 piretruma protiv larvi C. quinquefasciatus sa 0,132 mg/L na 0,107 mg/L, osim toga, u ovoj studiji je korišten SF proračun od 1,23.34,35,44].Procijenjena je kombinovana efikasnost ekstrakta korijena citrona Solanum i nekoliko sintetičkih insekticida (npr. fention, cipermetrin (sintetički piretroid) i timethphos (organofosforni larvicid)) protiv komaraca Anopheles.Stephensi [54] i C. quinquefasciatus [34].Kombinirana upotreba cipermetrina i ekstrakta petrolej etera žutog voća pokazala je sinergistički učinak na cipermetrin u svim omjerima.Najefikasniji omjer bila je binarna kombinacija 1:1 sa vrijednostima LC50 i SF od 0,0054 ppm i 6,83, respektivno, u odnosu na An.Stephen West[54].Dok je binarna mješavina S. xanthocarpum i temefosa 1:1 bila antagonistička (SF = 0,6406), kombinacija S. xanthocarpum-fention (1:1) je pokazala sinergističko djelovanje protiv C. quinquefasciatus sa SF od 1,3125 [34]].Tong i Blomquist [35] proučavali su efekte biljnog etilen oksida na toksičnost karbarila (karbamata širokog spektra) i permetrina na Aedes komarce.Aedes aegypti.Rezultati su pokazali da etilen oksid iz agara, crnog bibera, kleke, helikrizuma, sandalovine i susama povećava toksičnost karbarila na komarce Aedes.Vrijednosti SR aegypti larvae variraju od 1,0 do 7,0.Nasuprot tome, nijedan od EO nije bio toksičan za odrasle Aedes komarce.U ovoj fazi, nisu prijavljeni sinergistički efekti za kombinaciju Aedes aegypti i EO-carbaryl.PBO je korišten kao pozitivna kontrola za povećanje toksičnosti karbarila protiv Aedes komaraca.Vrijednosti SR larve Aedes aegypti i odraslih jedinki su 4,9-9,5 i 2,3, respektivno.Samo binarne mješavine permetrina i EO ili PBO su testirane na larvicidnu aktivnost.Smjesa EO-permetrina imala je antagonistički učinak, dok je mješavina PBO-permetrina imala sinergistički učinak protiv Aedes komaraca.Larve Aedes aegypti.Međutim, eksperimenti s odgovorom na dozu i procjena SR za mješavine PBO-permetrina još nisu izvedeni.Iako je postignuto malo rezultata u pogledu sinergijskih efekata fitosintetičkih kombinacija protiv vektora komaraca, ovi podaci podržavaju postojeće rezultate, koji otvaraju mogućnost dodavanja sinergista ne samo za smanjenje primijenjene doze, već i za povećanje efekta ubijanja.Efikasnost insekata.Osim toga, rezultati ove studije su po prvi put pokazali da ulja C. rotundus i A. galanga sinergistički pokazuju značajno veću efikasnost protiv sojeva Aedes komaraca osjetljivih i otpornih na piretroid u usporedbi s PBO u kombinaciji sa toksičnošću permetrina.Aedes aegypti.Međutim, neočekivani rezultati sinergističke analize pokazali su da ulje C. verum ima najveću aktivnost protiv odraslih osoba protiv oba Aedes soja.Iznenađujuće, toksični efekat permetrina na Aedes aegypti nije bio zadovoljavajući.Varijacije u toksičnim efektima i sinergističkim efektima mogu biti dijelom posljedica izloženosti različitim vrstama i razinama bioaktivnih komponenti u ovim uljima.
Uprkos naporima da se shvati kako poboljšati efikasnost, sinergijski mehanizmi ostaju nejasni.Mogući razlozi za različitu efikasnost i sinergistički potencijal mogu uključivati razlike u hemijskom sastavu testiranih proizvoda i razlike u osetljivosti komaraca povezane sa statusom i razvojem rezistencije.Postoje razlike između glavnih i sporednih komponenti etilen oksida testiranih u ovoj studiji, a pokazalo se da neki od ovih spojeva imaju repelentne i toksične efekte protiv raznih štetočina i vektora bolesti [61,62,64,67,68].Međutim, glavni spojevi okarakterizirani u uljima C. rotundus, A. galanga i C. verum, kao što su cipern, β-bisabolen i cinamaldehid, nisu testirani u ovom radu na njihovo djelovanje protiv odraslih i sinergističko djelovanje protiv Ae, respektivno.Aedes aegypti.Stoga su potrebna buduća istraživanja kako bi se izolirali aktivni sastojci prisutni u svakom eteričnom ulju i razjasnila njihova insekticidna efikasnost i sinergijske interakcije protiv ovog vektora komaraca.Općenito, insekticidna aktivnost ovisi o djelovanju i reakciji između otrova i tkiva insekata, što se može pojednostaviti i podijeliti u tri faze: prodiranje u kožu tijela insekata i membrane ciljnog organa, aktivacija (= interakcija sa metom) i detoksikacija.toksične supstance [57, 69].Stoga, sinergizam insekticida koji rezultira povećanom djelotvornošću kombinacija toksičnih tvari zahtijeva barem jednu od ovih kategorija, kao što je povećana penetracija, veća aktivacija akumuliranih spojeva ili manje smanjena detoksikacija aktivnog sastojka pesticida.Na primjer, energetska tolerancija odgađa prodiranje kutikule kroz zadebljanu kutikulu i biohemijsku otpornost, kao što je pojačan metabolizam insekticida uočen kod nekih rezistentnih sojeva insekata [70, 71].Značajna efikasnost EO u povećanju toksičnosti permetrina, posebno protiv PMD-R, može ukazivati na rješenje problema otpornosti na insekticide interakcijom s mehanizmima rezistencije [57, 69, 70, 71].Tong i Blomquist [35] su podržali rezultate ove studije demonstrirajući sinergističku interakciju između EO i sintetičkih pesticida.aegypti, postoje dokazi o inhibitornoj aktivnosti protiv enzima za detoksikaciju, uključujući monooksigenaze citokroma P450 i karboksilesteraze, koje su usko povezane s razvojem rezistencije na tradicionalne pesticide.Za PBO se ne kaže samo da je metabolički inhibitor monooksigenaze citokroma P450, već i poboljšava penetraciju insekticida, što je pokazano njegovom upotrebom kao pozitivne kontrole u sinergističkim studijama [35, 72].Zanimljivo je da je 1,8-cineol, jedna od važnih komponenti pronađenih u ulju galangala, poznat po svojim toksičnim efektima na vrste insekata [22, 63, 73] i za koji se navodi da ima sinergističke efekte u nekoliko područja istraživanja biološke aktivnosti [ 74]..,75,76,77].Osim toga, 1,8-cineol u kombinaciji s različitim lijekovima uključujući kurkumin [78], 5-fluorouracil [79], mefenaminsku kiselinu [80] i zidovudin [81] također ima učinak koji podstiče permeaciju.in vitro.Dakle, moguća uloga 1,8-cineola u sinergističkom insekticidnom djelovanju nije samo kao aktivni sastojak već i kao pojačivač penetracije.Zbog većeg sinergizma sa permetrinom, posebno protiv PMD-R, sinergistički efekti ulja galangala i ulja trihozantesa uočeni u ovoj studiji mogu biti rezultat interakcije sa mehanizmima rezistencije, odnosno povećanom propusnošću za hlor.Piretroidi povećavaju aktivaciju akumuliranih spojeva i inhibiraju enzime za detoksikaciju kao što su citokrom P450 monooksigenaze i karboksilesteraze.Međutim, ovi aspekti zahtijevaju dalje proučavanje kako bi se razjasnila specifična uloga EO i njegovih izoliranih spojeva (sam ili u kombinaciji) u sinergističkim mehanizmima.
Godine 1977. zabilježen je porast otpornosti na permetrin u glavnim populacijama vektora na Tajlandu, a tokom narednih decenija upotreba permetrina je u velikoj mjeri zamijenjena drugim piretroidnim kemikalijama, posebno onima zamijenjenim deltametrinom [82].Međutim, otpornost vektora na deltametrin i druge klase insekticida izuzetno je česta u cijeloj zemlji zbog pretjerane i uporne upotrebe [14, 17, 83, 84, 85, 86].Za borbu protiv ovog problema preporučuje se rotiranje ili ponovna upotreba odbačenih pesticida koji su prethodno bili efikasni i manje toksični za sisare, kao što je permetrin.Trenutno, iako je upotreba permetrina smanjena u nedavnim državnim programima kontrole komaraca, otpornost na permetrin se još uvijek može naći u populacijama komaraca.To može biti posljedica izlaganja komaraca komercijalnim proizvodima za kontrolu štetočina u domaćinstvu, koji se uglavnom sastoje od permetrina i drugih piretroida [14, 17].Stoga, uspješna prenamjena permetrina zahtijeva razvoj i implementaciju strategija za smanjenje otpornosti vektora.Iako nijedno od eteričnih ulja testiranih pojedinačno u ovoj studiji nije bilo tako efikasno kao permetrin, zajednički rad s permetrinom rezultirao je impresivnim sinergističkim efektima.Ovo je obećavajuća indikacija da interakcija EO sa mehanizmima rezistencije dovodi do toga da je kombinacija permetrina sa EO efikasnija od insekticida ili samog EO, posebno protiv PMD-R Ae.Aedes aegypti.Prednosti sinergističkih mješavina u povećanju učinkovitosti, uprkos korištenju nižih doza za kontrolu vektora, mogu dovesti do poboljšanog upravljanja rezistencijom i smanjenih troškova [33, 87].Iz ovih rezultata, zadovoljstvo je primijetiti da su A. galanga i C. rotundus EO bili značajno efikasniji od PBO u sinergizaciji toksičnosti permetrina u oba soja MCM-S i PMD-R i da su potencijalna alternativa tradicionalnim ergogenim pomagalima.
Odabrani EO su imali značajne sinergističke efekte u povećanju toksičnosti za odrasle protiv PMD-R Ae.aegypti, posebno galangalovo ulje, ima SR vrijednost do 1233,33, što ukazuje da EO ima široko obećanje kao sinergist u poboljšanju djelotvornosti permetrina.Ovo može stimulirati upotrebu novog aktivnog prirodnog proizvoda, što bi zajedno moglo povećati upotrebu visoko učinkovitih proizvoda za kontrolu komaraca.Također otkriva potencijal etilen oksida kao alternativnog sinergista za učinkovito poboljšanje starijih ili tradicionalnih insekticida za rješavanje postojećih problema otpornosti u populacijama komaraca.Korištenje lako dostupnih biljaka u programima suzbijanja komaraca ne samo da smanjuje ovisnost o uvezenim i skupim materijalima, već i stimuliše lokalne napore za jačanje sistema javnog zdravlja.
Ovi rezultati jasno pokazuju značajan sinergistički učinak koji proizvodi kombinacija etilen oksida i permetrina.Rezultati ističu potencijal etilen oksida kao biljnog sinergista u kontroli komaraca, povećavajući efikasnost permetrina protiv komaraca, posebno u otpornim populacijama.Budući razvoj i istraživanja zahtijevat će sinergističku bioanalizu ulja galangala i alpinije i njihovih izoliranih spojeva, kombinacije insekticida prirodnog ili sintetičkog porijekla protiv više vrsta i faza komaraca, te ispitivanje toksičnosti protiv neciljanih organizama.Praktična upotreba etilen oksida kao održivog alternativnog sinergista.
Svjetska zdravstvena organizacija.Globalna strategija za prevenciju i kontrolu denga groznice 2012–2020.Ženeva: Svjetska zdravstvena organizacija, 2012.
Weaver SC, Costa F., Garcia-Blanco MA, Ko AI, Ribeiro GS, Saade G., et al.Zika virus: istorijat, pojava, biologija i izgledi za kontrolu.Antivirusna istraživanja.2016;130:69–80.
Svjetska zdravstvena organizacija.Podaci o denga groznici.2016. http://www.searo.who.int/entity/vector_borne_tropical_diseases/data/data_factsheet/en/.Datum pristupa: 20. januar 2017
Odjel za javno zdravlje.Trenutni status denga groznice i denga hemoragične groznice na Tajlandu.2016. http://www.m-society.go.th/article_attach/13996/17856.pdf.Datum pristupa: 6. januar 2017
Ooi EE, Goh CT, Gabler DJ.35 godina prevencije denga groznice i kontrole vektora u Singapuru.Iznenadna zarazna bolest.2006;12:887–93.
Morrison AC, Zielinski-Gutierrez E, Scott TW, Rosenberg R. Identifikovati izazove i predložiti rješenja za kontrolu Aedes aegypti virusnih vektora.PLOS Medicine.2008;5:362–6.
Centri za kontrolu i prevenciju bolesti.Denga groznica, entomologija i ekologija.2016. http://www.cdc.gov/dengue/entomologyecology/.Datum pristupa: 6. januar 2017
Ohimain EI, Angaye TKN, Bassey SE Poređenje larvicidne aktivnosti lišća, kore, stabljike i korijena Jatropa curcas (Euphorbiaceae) protiv vektora malarije Anopheles gambiae.SZhBR.2014;3:29-32.
Soleimani-Ahmadi M, Watandoust H, Zareh M. Karakteristike staništa Anopheles larvae u područjima malarije u programu eradikacije malarije u jugoistočnom Iranu.Azijsko-pacifički J Trop Biomed.2014; 4 (Suppl 1): S73–80.
Bellini R, Zeller H, Van Bortel W. Pregled pristupa kontroli vektora, prevenciji i kontroli izbijanja virusa zapadnog Nila i izazova s kojima se Evropa suočava.Vektor parazita.2014;7:323.
Muthusamy R., Shivakumar MS Selekcija i molekularni mehanizmi otpornosti na cipermetrin kod crvenih gusjenica (Amsacta albistriga Walker).Biohemijska fiziologija štetočina.2014;117:54–61.
Ramkumar G., Shivakumar MS Laboratorijska studija otpornosti na permetrin i unakrsne rezistencije Culex quinquefasciatus na druge insekticide.Palastor istraživački centar.2015;114:2553–60.
Matsunaka S, Hutson DH, Murphy SD.Pesticide Chemistry: Human Welfare and the Environment, Vol.3: Mehanizam djelovanja, metabolizam i toksikologija.New York: Pergamon Press, 1983.
Chareonviriyaphap T, Bangs MJ, Souvonkert V, Kongmi M, Korbel AV, Ngoen-Klan R. Pregled otpornosti na insekticide i izbjegavanja ponašanja vektora ljudskih bolesti u Tajlandu.Vektor parazita.2013;6:280.
Chareonviriyaphap T, Aum-Aung B, Ratanatham S. Trenutni obrasci otpornosti na insekticide među vektorima komaraca na Tajlandu.Jugoistočna Azija J Trop Med Public Health.1999;30:184-94.
Chareonviriyaphap T, Bangs MJ, Ratanatham S. Status malarije na Tajlandu.Jugoistočna Azija J Trop Med Public Health.2000;31:225–37.
Plernsub S, Saingamsuk J, Yanola J, Lumjuan N, Thippavankosol P, Walton S, Somboon P. Vremenska frekvencija mutacija otpornosti na pad F1534C i V1016G kod komaraca Aedes aegypti u Chiang Maiju, Tajland, i utjecaj termalnih mutacija na Tajlandu koji sadrže piretroide.Aktatrop.2016;162:125–32.
Vontas J, Kioulos E, Pavlidi N, Moru E, Della Torre A, Ranson H. Otpornost na insekticide u glavnim vektorima denga groznice Aedes albopictus i Aedes aegypti.Biohemijska fiziologija štetočina.2012;104:126–31.
Vrijeme objave: Jul-08-2024