Široko rasprostranjena upotreba sintetičkih pesticida dovela je do mnogih problema, uključujući pojavu otpornih organizama, degradaciju okoliša i štetu po ljudsko zdravlje. Stoga su novi mikrobiološkipesticidiHitno su potrebni preparati koji su sigurni za ljudsko zdravlje i okoliš. U ovoj studiji, ramnolipidni biosurfaktant koji proizvodi Enterobacter cloacae SJ2 korišten je za procjenu toksičnosti za larve komaraca (Culex quinquefasciatus) i termita (Odontotermes obesus). Rezultati su pokazali da je postojala stopa smrtnosti zavisna od doze između tretmana. Vrijednost LC50 (50% letalna koncentracija) nakon 48 sati za biosurfaktante termita i larvi komaraca određena je metodom prilagođavanja nelinearne regresijske krivulje. Rezultati su pokazali da su vrijednosti LC50 nakon 48 sati (95% interval pouzdanosti) larvicidne i antitermitske aktivnosti biosurfaktanta bile 26,49 mg/L (raspon 25,40 do 27,57) i 33,43 mg/L (raspon 31,09 do 35,68). Prema histopatološkom pregledu, tretman biosurfaktantima uzrokovao je ozbiljno oštećenje organelnog tkiva larvi i termita. Rezultati ove studije pokazuju da je mikrobni biosurfaktant koji proizvodi Enterobacter cloacae SJ2 odlično i potencijalno efikasno sredstvo za kontrolu Cx, quinquefasciatus i O. obesus.
Tropske zemlje suočavaju se s velikim brojem bolesti koje prenose komarci1. Relevantnost bolesti koje prenose komarci je široko rasprostranjena. Više od 400.000 ljudi umire od malarije svake godine, a neki veći gradovi doživljavaju epidemije ozbiljnih bolesti poput denge, žute groznice, čikungunje i Zike.2 Bolesti koje prenose vektori povezane su s jednom od šest infekcija širom svijeta, pri čemu komarci uzrokuju najznačajnije slučajeve3,4. Culex, Anopheles i Aedes su tri roda komaraca koja se najčešće povezuju s prijenosom bolesti5. Prevalencija denge groznice, infekcije koju prenosi komarac Aedes aegypti, povećala se u posljednjoj deceniji i predstavlja značajnu prijetnju javnom zdravlju4,7,8. Prema Svjetskoj zdravstvenoj organizaciji (WHO), više od 40% svjetske populacije je u riziku od denge groznice, sa 50-100 miliona novih slučajeva koji se javljaju godišnje u više od 100 zemalja9,10,11. Denge groznica postala je glavni problem javnog zdravlja jer se njena incidencija povećala širom svijeta12,13,14. Anopheles gambiae, poznatiji kao afrički komarac Anopheles, najvažniji je vektor ljudske malarije u tropskim i suptropskim regijama15. Virus Zapadnog Nila, encefalitis St. Louisa, japanski encefalitis i virusne infekcije konja i ptica prenose komarci Culex, često nazivani i kućnim komarcima. Osim toga, oni su i prenosioci bakterijskih i parazitskih bolesti16. U svijetu postoji više od 3.000 vrsta termita, a postoje više od 150 miliona godina17. Većina štetočina živi u tlu i hrani se drvetom i proizvodima od drveta koji sadrže celulozu. Indijski termit Odontotermes obesus je važna štetočina koja uzrokuje ozbiljne štete važnim usjevima i drveću na plantažama18. U poljoprivrednim područjima, infestacije termitima u različitim fazama mogu uzrokovati ogromnu ekonomsku štetu raznim usjevima, vrstama drveća i građevinskim materijalima. Termiti također mogu uzrokovati probleme sa ljudskim zdravljem19.
Pitanje otpornosti mikroorganizama i štetočina u današnjoj farmaceutskoj i poljoprivrednoj oblasti je složeno20,21. Stoga bi obje kompanije trebale tražiti nove isplative antimikrobne lijekove i sigurne biopesticide. Sintetički pesticidi su sada dostupni i pokazalo se da su zarazni i odbijaju korisne insekte koji nisu ciljne skupine22. Posljednjih godina, istraživanje biosurfaktanata se proširilo zbog njihove primjene u raznim industrijama. Biosurfaktanti su vrlo korisni i vitalni u poljoprivredi, sanaciji tla, ekstrakciji nafte, uklanjanju bakterija i insekata te preradi hrane23,24. Biosurfaktanti ili mikrobni surfaktanti su hemikalije biosurfaktanta koje proizvode mikroorganizmi poput bakterija, kvasaca i gljivica u obalnim staništima i područjima kontaminiranim naftom25,26. Hemijski izvedeni surfaktanti i biosurfaktanti su dvije vrste koje se dobijaju direktno iz prirodnog okruženja27. Različiti biosurfaktanti se dobijaju iz morskih staništa28,29. Stoga naučnici traže nove tehnologije za proizvodnju biosurfaktanata na bazi prirodnih bakterija30,31. Napredak u takvim istraživanjima pokazuje važnost ovih bioloških spojeva za zaštitu okoliša32. Bacillus, Pseudomonas, Rhodococcus, Alcaligenes, Corynebacterium i ovi bakterijski rodovi su dobro proučeni predstavnici23,33.
Postoji mnogo vrsta biosurfaktanata sa širokim spektrom primjene34. Značajna prednost ovih spojeva je što neki od njih imaju antibakterijsko, larvicidno i insekticidno djelovanje. To znači da se mogu koristiti u poljoprivrednoj, hemijskoj, farmaceutskoj i kozmetičkoj industriji35,36,37,38. Budući da su biosurfaktanti uglavnom biorazgradivi i ekološki korisni, koriste se u integriranim programima suzbijanja štetočina za zaštitu usjeva39. Na taj način su stečena osnovna znanja o larvicidnom i antitermitskom djelovanju mikrobnih biosurfaktanata koje proizvodi Enterobacter cloacae SJ2. Ispitali smo smrtnost i histološke promjene pri izlaganju različitim koncentracijama ramnolipidnih biosurfaktanata. Osim toga, procijenili smo široko korišteni kompjuterski program za kvantitativnu strukturu-aktivnost (QSAR) pod nazivom Ecological Structure-Activity (ECOSAR) kako bismo odredili akutnu toksičnost za mikroalge, dafnije i ribe.
U ovoj studiji, testirana je antitermitska aktivnost (toksičnost) pročišćenih biosurfaktanata pri različitim koncentracijama u rasponu od 30 do 50 mg/ml (u intervalima od 5 mg/ml) protiv indijskih termita, O. obesus i četvrte vrste. (Procijenite. Larve instara Cx. Larve komaraca quinquefasciatus. Koncentracije LC50 biosurfaktanta tokom 48 sati protiv O. obesus i Cx. C. solanacearum. Larve komaraca identificirane su metodom nelinearne regresijske krivulje. Rezultati su pokazali da se smrtnost termita povećava s povećanjem koncentracije biosurfaktanta. Rezultati su pokazali da biosurfaktant ima larvicidno djelovanje (Slika 1) i antitermitno djelovanje (Slika 2), sa 48-satnim LC50 vrijednostima (95% CI) od 26,49 mg/L (25,40 do 27,57) i 33,43 mg/l (Slika 31,09 do 35,68), respektivno (Tabela 1). U smislu akutne toksičnosti (48 sati), biosurfaktant je klasifikovan kao "štetan" za testirane organizme. Biosurfaktant proizveden u ovoj studiji pokazao je odlično larvicidno djelovanje sa 100% smrtnosti unutar 24-48 sati od izlaganja.
Izračunajte LC50 vrijednost za larvicidno djelovanje. Prilagođavanje krivulje nelinearne regresije (puna linija) i 95% interval pouzdanosti (zasjenjeno područje) za relativnu smrtnost (%).
Izračunajte LC50 vrijednost za antitermitsku aktivnost. Prilagođavanje krivulje nelinearne regresije (puna linija) i 95% interval pouzdanosti (zasjenjeno područje) za relativnu smrtnost (%).
Na kraju eksperimenta, morfološke promjene i anomalije su uočene pod mikroskopom. Morfološke promjene su uočene u kontrolnoj i tretiranoj grupi pri uvećanju od 40x. Kao što je prikazano na Slici 3, poremećaj rasta se javio kod većine larvi tretiranih biosurfaktantima. Slika 3a prikazuje normalni Cx. quinquefasciatus, Slika 3b prikazuje anomalni Cx. Uzrokuje pet larvi nematoda.
Učinak subletalnih (LC50) doza biosurfaktanata na razvoj larvi Culex quinquefasciatus. Slika svjetlosnog mikroskopa (a) normalnog Cx pri uvećanju od 40×. quinquefasciatus (b) Abnormalni Cx. Uzrokuje pet larvi nematoda.
U ovoj studiji, histološki pregled tretiranih larvi (Sl. 4) i termita (Sl. 5) otkrio je nekoliko abnormalnosti, uključujući smanjenje abdominalne površine i oštećenje mišića, epitelnih slojeva i kože srednjeg crijeva. Histologija je otkrila mehanizam inhibitorne aktivnosti biosurfaktanta korištenog u ovoj studiji.
Histopatologija normalnih netretiranih larvi Cx 4. instara. Larve quinquefasciatus (kontrola: (a,b)) i tretirane biosurfaktantom (tretman: (c,d)). Strelice označavaju tretirani crijevni epitel (epi), jezgre (n) i mišić (mu). Traka = 50 µm.
Histopatologija normalnog netretiranog O. obesus (kontrola: (a, b)) i tretiranog biosurfaktantom (tretman: (c, d)). Strelice označavaju crijevni epitel (epi) i mišić (mu), respektivno. Traka = 50 µm.
U ovoj studiji, ECOSAR je korišten za predviđanje akutne toksičnosti ramnolipidnih biosurfaktantnih proizvoda za primarne proizvođače (zelene alge), primarne potrošače (vodene buhe) i sekundarne potrošače (ribe). Ovaj program koristi sofisticirane kvantitativne modele strukture i aktivnosti spojeva za procjenu toksičnosti na osnovu molekularne strukture. Model koristi softver strukture i aktivnosti (SAR) za izračunavanje akutne i dugoročne toksičnosti supstanci za vodene vrste. Konkretno, Tabela 2 sumira procijenjene srednje letalne koncentracije (LC50) i srednje efektivne koncentracije (EC50) za nekoliko vrsta. Sumnjiva toksičnost je kategorizirana u četiri nivoa korištenjem Globalno harmoniziranog sistema klasifikacije i označavanja hemikalija (Tabela 3).
Suzbijanje vektorskih bolesti, posebno sojeva komaraca i komaraca vrste Aedes. Egipćani sada otežavaju rad 40,41,42,43,44,45,46. Iako su neki hemijski dostupni pesticidi, poput piretroida i organofosfata, donekle korisni, oni predstavljaju značajan rizik za ljudsko zdravlje, uključujući dijabetes, reproduktivne poremećaje, neurološke poremećaje, rak i respiratorne bolesti. Štaviše, vremenom ovi insekti mogu postati otporni na njih13,43,48. Stoga će efikasne i ekološki prihvatljive biološke mjere suzbijanja postati popularnija metoda suzbijanja komaraca49,50. Benelli51 je sugerirao da bi rana kontrola vektorskih komaraca bila efikasnija u urbanim područjima, ali nisu preporučili upotrebu larvicida u ruralnim područjima52. Tom i saradnici53 također su sugerirali da bi suzbijanje komaraca u njihovim nezrelim fazama bila sigurna i jednostavna strategija jer su osjetljiviji na sredstva za suzbijanje 54.
Proizvodnja biosurfaktanta pomoću potentnog soja (Enterobacter cloacae SJ2) pokazala je konzistentnu i obećavajuću efikasnost. Naša prethodna studija je izvijestila da Enterobacter cloacae SJ2 optimizira proizvodnju biosurfaktanta korištenjem fizičko-hemijskih parametara26. Prema njihovoj studiji, optimalni uslovi za proizvodnju biosurfaktanta potencijalnim izolatom E. cloacae bili su inkubacija tokom 36 sati, miješanje pri 150 rpm, pH 7,5, 37 °C, salinitet 1 ppt, 2% glukoze kao izvora ugljika, 1% kvasca. Ekstrakt je korišten kao izvor dušika za dobijanje 2,61 g/L biosurfaktanta. Pored toga, biosurfaktanti su okarakterizirani korištenjem TLC, FTIR i MALDI-TOF-MS. Ovo je potvrdilo da je ramnolipid biosurfaktant. Glikolipidni biosurfaktanti su najintenzivnije proučavana klasa drugih vrsta biosurfaktanata55. Sastoje se od ugljikohidratnih i lipidnih dijelova, uglavnom lanaca masnih kiselina. Među glikolipidima, glavni predstavnici su ramnolipid i soforolipid56. Ramnolipidi sadrže dva ramnozna dijela povezana s mono- ili di-β-hidroksidekanskom kiselinom 57. Upotreba ramnolipida u medicinskoj i farmaceutskoj industriji je dobro utvrđena 58, pored njihove nedavne upotrebe kao pesticida 59.
Interakcija biosurfaktanta s hidrofobnim područjem respiratornog sifona omogućava vodi da prolazi kroz njegovu stomatalnu šupljinu, čime se povećava kontakt larvi s vodenom okolinom. Prisustvo biosurfaktanta također utječe na dušnik, čija je dužina blizu površine, što larvama olakšava puzanje do površine i disanje. Kao rezultat toga, površinska napetost vode se smanjuje. Budući da se larve ne mogu pričvrstiti za površinu vode, padaju na dno rezervoara, remeteći hidrostatički pritisak, što rezultira prekomjernom potrošnjom energije i smrću utapanjem38,60. Slične rezultate je dobio Ghribi61, gdje je biosurfaktant koji proizvodi Bacillus subtilis pokazao larvicidno djelovanje protiv Ephestia kuehniella. Slično tome, larvicidno djelovanje Cx. Dasa i Mukherjeea23 također je procijenilo učinak cikličkih lipopeptida na larve quinquefasciatusa.
Rezultati ove studije odnose se na larvicidno djelovanje ramnolipidnih biosurfaktanata protiv Cx. Ubijanje komaraca vrste quinquefasciatus u skladu je s prethodno objavljenim rezultatima. Na primjer, koriste se biosurfaktanti na bazi surfaktina koje proizvode različite bakterije roda Bacillus i Pseudomonas spp. Neki rani izvještaji64,65,66 izvijestili su o aktivnosti lipopeptidnih biosurfaktanata iz Bacillus subtilis23 u ubijanju larvi. Deepali i sar.63 otkrili su da ramnolipidni biosurfaktant izoliran iz Stenotropomonas maltophilia ima snažno larvicidno djelovanje pri koncentraciji od 10 mg/L. Silva i sar.67 izvijestili su o larvicidnom djelovanju ramnolipidnog biosurfaktanta protiv Ae pri koncentraciji od 1 g/L. Aedes aegypti. Kanakdande i sar. 68 je izvijestio da lipopeptidni biosurfaktanti koje proizvodi Bacillus subtilis uzrokuju ukupnu smrtnost larvi Culexa i termita s lipofilnom frakcijom Eucalyptusa. Slično tome, Masendra i sar. 69 su izvijestili o smrtnosti radiličnih mrava (Cryptotermes cynocephalus Light.) od 61,7% u lipofilnim frakcijama n-heksana i EtOAc sirovog ekstrakta E.
Parthipan i saradnici 70 izvijestili su o insekticidnoj upotrebi lipopeptidnih biosurfaktanata koje proizvode Bacillus subtilis A1 i Pseudomonas stutzeri NA3 protiv Anopheles Stephensi, vektora parazita malarije Plasmodium. Primijetili su da larve i kukuljice duže preživljavaju, imaju kraće periode polaganja jaja, da su sterilne i da imaju kraći životni vijek kada su tretirane različitim koncentracijama biosurfaktanata. Uočene LC50 vrijednosti biosurfaktanta B. subtilis A1 bile su 3,58, 4,92, 5,37, 7,10 i 7,99 mg/L za različita stanja larvi (tj. larve I, II, III, IV i stadij kukuljice). Poređenja radi, biosurfaktanti za stadije larvi I-IV i stadij kukuljice Pseudomonas stutzeri NA3 bili su 2,61, 3,68, 4,48, 5,55 i 6,99 mg/L, respektivno. Smatra se da je odložena fenologija preživjelih larvi i kukuljica rezultat značajnih fizioloških i metaboličkih poremećaja uzrokovanih tretmanima insekticidima71.
Soj Wickerhamomyces anomalus CCMA 0358 proizvodi biosurfaktant sa 100% larvicidnom aktivnošću protiv komaraca Aedes. 24-satni interval aegypti 38 bio je veći nego što su izvijestili Silva i saradnici. Pokazalo se da biosurfaktant proizveden iz Pseudomonas aeruginosa korištenjem suncokretovog ulja kao izvora ugljika ubija 100% larvi u roku od 48 sati 67. Abinaya i saradnici72 i Pradhan i saradnici73 također su pokazali larvicidne ili insekticidne efekte surfaktanata koje proizvodi nekoliko izolata roda Bacillus. Prethodno objavljena studija Senthil-Nathana i saradnika otkrila je da je 100% larvi komaraca izloženih biljnim lagunama vjerovatno uginulo. 74.
Procjena subletalnih efekata insekticida na biologiju insekata je ključna za programe integriranog upravljanja štetočinama jer subletalne doze/koncentracije ne ubijaju insekte, ali mogu smanjiti populacije insekata u budućim generacijama narušavanjem bioloških karakteristika10. Siqueira i saradnici75 su primijetili potpunu larvicidnu aktivnost (100% smrtnost) ramnolipidnog biosurfaktanta (300 mg/ml) kada je testiran pri različitim koncentracijama u rasponu od 50 do 300 mg/ml. Larvalni stadij sojeva Aedes aegypti. Analizirali su efekte vremena do smrti i subletalnih koncentracija na preživljavanje larvi i aktivnost plivanja. Osim toga, primijetili su smanjenje brzine plivanja nakon 24-48 sati izlaganja subletalnim koncentracijama biosurfaktanta (npr. 50 mg/mL i 100 mg/mL). Smatra se da su otrovi koji imaju obećavajuće subletalne uloge efikasniji u nanošenju višestruke štete izloženim štetočinama76.
Histološka posmatranja naših rezultata ukazuju na to da biosurfaktanti koje proizvodi Enterobacter cloacae SJ2 značajno mijenjaju tkiva larvi komaraca (Cx. quinquefasciatus) i termita (O. obesus). Slične anomalije uzrokovane su preparatima ulja bosiljka kod An. gambiaes.s i An. arabica koje je opisao Ochola77. Kamaraj i saradnici78 također su opisali iste morfološke abnormalnosti kod An. Larve Stephanie bile su izložene nanočesticama zlata. Vasantha-Srinivasan i saradnici79 također su izvijestili da je eterično ulje pastirske torbice ozbiljno oštetilo komoru i epitelne slojeve Aedes albopictus. Aedes aegypti. Raghavendran i saradnici izvijestili su da su larve komaraca tretirane sa 500 mg/ml micelijskog ekstrakta lokalne gljivice Penicillium. Ae pokazuju ozbiljna histološka oštećenja. aegypti i Cx. Stopa smrtnosti 80. Prethodno su Abinaya i saradnici proučavali larve četvrtog instara An. Stephensi i Ae. aegypti je pronašao brojne histološke promjene kod Aedes aegypti tretiranog egzopolisaharidima B. licheniformis, uključujući gastrični cekum, atrofiju mišića, oštećenje i dezorganizaciju ganglija nervnih vrpci72. Prema Raghavendranu i saradnicima, nakon tretmana ekstraktom micelija P. daleae, ćelije srednjeg crijeva testiranih komaraca (larve 4. instara) pokazale su oticanje crijevnog lumena, smanjenje međućelijskog sadržaja i degeneraciju jezgre81. Iste histološke promjene uočene su kod larvi komaraca tretiranih ekstraktom lista ehinaceje, što ukazuje na insekticidni potencijal tretiranih jedinjenja50.
Upotreba ECOSAR softvera dobila je međunarodno priznanje82. Trenutna istraživanja ukazuju na to da akutna toksičnost ECOSAR biosurfaktanata za mikroalge (C. vulgaris), ribe i vodene buhe (D. magna) spada u kategoriju „toksičnosti“ koju su definirale Ujedinjene nacije83. ECOSAR model ekotoksičnosti koristi SAR i QSAR za predviđanje akutne i dugoročne toksičnosti supstanci i često se koristi za predviđanje toksičnosti organskih zagađivača82,84.
Paraformaldehid, natrijum-fosfatni pufer (pH 7,4) i sve ostale hemikalije korištene u ovoj studiji kupljene su od HiMedia Laboratories, Indija.
Proizvodnja biosurfaktanta provedena je u Erlenmeyerovim tikvicama od 500 mL koje su sadržavale 200 mL sterilnog Bushnell Haas medija dopunjenog sa 1% sirove nafte kao jedinog izvora ugljika. Prekultura Enterobacter cloacae SJ2 (1,4 × 104 CFU/ml) je inokulirana i kultivirana na orbitalnoj mućkalici na 37°C, 200 rpm tokom 7 dana. Nakon perioda inkubacije, biosurfaktant je ekstrahiran centrifugiranjem medija za kulturu na 3400×g tokom 20 minuta na 4°C, a dobiveni supernatant je korišten za potrebe skrininga. Procedure optimizacije i karakterizacije biosurfaktanta usvojene su iz naše ranije studije26.
Larve Culex quinquefasciatus su dobijene iz Centra za napredna istraživanja morske biologije (CAS), Palancipetai, Tamil Nadu (Indija). Larve su uzgajane u plastičnim posudama napunjenim deioniziranom vodom na temperaturi od 27 ± 2°C i fotoperiodu od 12:12 (svjetlo:tama). Larve komaraca su hranjene 10% rastvorom glukoze.
Larve Culex quinquefasciatus pronađene su u otvorenim i nezaštićenim septičkim jamama. Koristite standardne smjernice za klasifikaciju za identifikaciju i kultivaciju larvi u laboratoriji85. Larvicidni pokusi provedeni su u skladu s preporukama Svjetske zdravstvene organizacije86. SH. Larve četvrtog instara quinquefasciatusa sakupljene su u zatvorene epruvete u grupama od 25 ml i 50 ml sa zračnim razmakom od dvije trećine njihovog kapaciteta. Biosurfaktant (0–50 mg/ml) dodan je u svaku epruvetu pojedinačno i pohranjen na 25 °C. Kontrolna epruveta koristila je samo destilovanu vodu (50 ml). Mrtvim larvama smatrane su one koje nisu pokazivale znakove plivanja tokom perioda inkubacije (12–48 sati)87. Izračunajte postotak smrtnosti larvi koristeći jednačinu. (1)88.
Porodica Odontotermitidae uključuje indijskog termita Odontotermes obesus, pronađen u trulim trupcima na Poljoprivrednom kampusu (Univerzitet Annamalai, Indija). Testirajte ovaj biosurfaktant (0–50 mg/ml) koristeći uobičajene postupke kako biste utvrdili da li je štetan. Nakon sušenja u laminarnom protoku zraka tokom 30 minuta, svaka traka Whatman papira premazana je biosurfaktantom u koncentraciji od 30, 40 ili 50 mg/ml. Prethodno premazane i nepremazane trake papira testirane su i upoređene u centru Petrijeve zdjelice. Svaka Petrijeva zdjelica sadrži oko trideset aktivnih termita O. obesus. Kontrolnim i testnim termitima dat je mokri papir kao izvor hrane. Sve ploče su držane na sobnoj temperaturi tokom perioda inkubacije. Termiti su uginuli nakon 12, 24, 36 i 48 sati89,90. Jednačina 1 je zatim korištena za procjenu procenta smrtnosti termita pri različitim koncentracijama biosurfaktanta. (2).
Uzorci su čuvani na ledu i pakovani u mikroepruvete koje su sadržavale 100 ml 0,1 M natrijum fosfatnog pufera (pH 7,4) i poslani u Centralni laboratorij za patologiju akvakulture (CAPL) Centra za akvakulturu Rajiv Gandhi (RGCA), Histološki laboratorij, Sirkali, okrug Mayiladuthurai, Tamil Nadu, Indija, radi daljnje analize. Uzorci su odmah fiksirani u 4% paraformaldehidu na 37°C tokom 48 sati.
Nakon faze fiksacije, materijal je tri puta ispran sa 0,1 M natrijum fosfatnim puferom (pH 7,4), postepeno dehidriran u etanolu i natapan u LEICA smoli tokom 7 dana. Supstanca se zatim stavlja u plastični kalup napunjen smolom i polimerizatorom, a zatim u peć zagrijanu na 37°C dok se blok koji sadrži supstancu potpuno ne polimerizuje.
Nakon polimerizacije, blokovi su izrezani korištenjem mikrotoma LEICA RM2235 (Rankin Biomedical Corporation 10,399 Enterprise Dr. Davisburg, MI 48,350, SAD) na debljinu od 3 mm. Presjeci su grupirani na pločicama, sa šest presjeka po pločici. Pločice su sušene na sobnoj temperaturi, zatim obojene hematoksilinom 7 minuta i isprane tekućom vodom 4 minute. Osim toga, nanesite otopinu eozina na kožu 5 minuta i isperite tekućom vodom 5 minuta.
Akutna toksičnost je predviđena korištenjem vodenih organizama s različitih tropskih nivoa: 96-satni LC50 za ribe, 48-satni LC50 za D. magna i 96-satni EC50 za zelene alge. Toksičnost ramnolipidnih biosurfaktanata za ribe i zelene alge procijenjena je korištenjem ECOSAR softvera verzije 2.2 za Windows koji je razvila Agencija za zaštitu okoliša SAD-a. (Dostupno na mreži na https://www.epa.gov/tsca-screening-tools/ecological-struct-activity-relationships-ecosar-predictive-model).
Svi testovi za larvicidno i antitermitske aktivnosti provedeni su u tri primjerka. Nelinearna regresija (log varijabli odgovora na dozu) podataka o smrtnosti larvi i termita provedena je kako bi se izračunala srednja letalna koncentracija (LC50) s intervalom pouzdanosti od 95%, a krivulje odgovora na koncentraciju generirane su korištenjem programa Prism® (verzija 8.0, GraphPad Software) Inc., SAD) 84, 91.
Ova studija otkriva potencijal mikrobnih biosurfaktanata koje proizvodi Enterobacter cloacae SJ2 kao larvicidnih i antitermitičkih sredstava protiv komaraca, a ovaj rad će doprinijeti boljem razumijevanju mehanizama larvicidnog i antitermitičkog djelovanja. Histološke studije larvi tretiranih biosurfaktantima pokazale su oštećenje probavnog trakta, srednjeg crijeva, moždane kore i hiperplaziju crijevnih epitelnih ćelija. Rezultati: Toksikološka evaluacija antitermitske i larvicidne aktivnosti ramnolipidnog biosurfaktanta koji proizvodi Enterobacter cloacae SJ2 otkrila je da je ovaj izolat potencijalni biopesticid za kontrolu vektorski prenosivih bolesti komaraca (Cx quinquefasciatus) i termita (O. obesus). Postoji potreba za razumijevanjem osnovne toksičnosti biosurfaktanata za okoliš i njihovog potencijalnog utjecaja na okoliš. Ova studija pruža naučnu osnovu za procjenu rizika biosurfaktanata za okoliš.
Vrijeme objave: 09.04.2024.